实验二十一 气相色谱法测定午餐肉中的有机氯农药 一、目的与要求： 1、掌握有机氯农药残留量的测定方法 2、初步掌握国产 103 型气相色谱仪的使用方法。 二、原理： 气相色谱法是一种比较新型的物理分离的分析方法，其作用原理是当样品组 分经气化呈气态的载气的携带下，通过填满固定相的色谱柱时，由于样品组分在 气-液(或气-固)两相中的分配(或吸附)系数的不同而得到分离。在柱后接上检测 器，显示色谱峰，与有机氯农药标准溶液比较即可定性和定量地测得样品的组成 成分。 三、试剂与仪器： 1、试剂 (1)丙酮重蒸 (2)石油醚 60-90℃经全玻璃系统蒸馏器重蒸至色谱图无异常． (3)无水硫酸钠(AB)，550℃灼烧 4 小时。 (4)内标溶液，以环氧七氯为内标：称环氧七氯 0.0100 克以上，用少许丙酮溶 解，用石油醚定容至 100 毫升。 (5)农药的标准溶液： λ分另 Jj 称取 2-666，β-666，γ-666，δ-666，PP`-DDE，0P， -DDT，PP`-DDD， PP-DDT 标准样品各 0.01 克用少量丙酮溶解后，以石油醚定容 100 毫升，(100ug ／ml)称 A 液。 B、精密吸取 2-666，γ-666，A 溶液 5 毫升，δ-666A 溶液 10 毫升， β-666，PP`-DDE，0P-DDT，PP`-DDD，PP-DDTA 溶液各 25 毫升，置于 1000 毫升容量瓶中，用石油醚定容为 B 液，δ-666，γ-666，B 液浓度为(0.5ug／ml)， 6-666B 液浓度为(1ug／ml)，β-666，PP`-DDE，0P`-DDT，PP-DDD`，PP-DDT` 浓度为(2.5ug／ml)， c、配制几种不同浓度应用的标准 C 液。 分别取 8 种 B 液各 16 毫升，14 毫升，12 毫升，10 毫升，8 毫升置 5 个 100 毫升容量瓶内，分别加 100 微升环氧七氯后用石油醚定容到 100 毫升为 C 液
实验二十一 气相色谱法测定午餐肉中的有机氯农药 一、目的与要求： 1、掌握有机氯农药残留量的测定方法 2、初步掌握国产 103 型气相色谱仪的使用方法。 二、原理： 气相色谱法是一种比较新型的物理分离的分析方法，其作用原理是当样品组 分经气化呈气态的载气的携带下，通过填满固定相的色谱柱时，由于样品组分在 气-液(或气-固)两相中的分配(或吸附)系数的不同而得到分离。在柱后接上检测 器，显示色谱峰，与有机氯农药标准溶液比较即可定性和定量地测得样品的组成 成分。 三、试剂与仪器： 1、试剂 (1)丙酮重蒸 (2)石油醚 60-90℃经全玻璃系统蒸馏器重蒸至色谱图无异常． (3)无水硫酸钠(AB)，550℃灼烧 4 小时。 (4)内标溶液，以环氧七氯为内标：称环氧七氯 0.0100 克以上，用少许丙酮溶 解，用石油醚定容至 100 毫升。 (5)农药的标准溶液： λ分另 Jj 称取 2-666，β-666，γ-666，δ-666，PP`-DDE，0P， -DDT，PP`-DDD， PP-DDT 标准样品各 0.01 克用少量丙酮溶解后，以石油醚定容 100 毫升，(100ug ／ml)称 A 液。 B、精密吸取 2-666，γ-666，A 溶液 5 毫升，δ-666A 溶液 10 毫升， β-666，PP`-DDE，0P-DDT，PP`-DDD，PP-DDTA 溶液各 25 毫升，置于 1000 毫升容量瓶中，用石油醚定容为 B 液，δ-666，γ-666，B 液浓度为(0.5ug／ml)， 6-666B 液浓度为(1ug／ml)，β-666，PP`-DDE，0P`-DDT，PP-DDD`，PP-DDT` 浓度为(2.5ug／ml)， c、配制几种不同浓度应用的标准 C 液。 分别取 8 种 B 液各 16 毫升，14 毫升，12 毫升，10 毫升，8 毫升置 5 个 100 毫升容量瓶内，分别加 100 微升环氧七氯后用石油醚定容到 100 毫升为 C 液
2、仪器 103 型气相比色谱仪，电子捕获检定器。 色谱柱长 1.2 米，内径 3 毫米螺旋形不锈钢柱固定液用 OV-173％及 QF15％混 合液。 柱体 Chromosorbw 80-100 目 柱温 190℃，载气高纯 N2 检测温度 210℃，载气流 40ml／分 汽化温度 210℃。 四、高脂样品的提取： (1)消化： 称取均样 10 克于 200 毫升园底瓶中，加入 35 毫升高氯酸冰醋酸(1：1)混酸 于 90℃水浴上加热(加热时要不停地振摇以免结成炭粒)，直到样品完全溶解为 止，溶液呈紫红色液体，冷却，加水 35 毫升(水：酸＝1：1)，如溶液发热仍需 冷却。 (2)抽提： 用(bp60-90℃)石油醚，以 40，30，30 毫升萃取 3 次，合并萃取液，通过无水 硫酸钠柱子，抽提液全量为 100。 (3)净化： 将 l00 毫升石油醚抽提倒入 250 毫升分液漏半中，加 10 毫升浓硫酸(酸：石油 醚＝1：l0)，轻轻振摇，静置分层(放置过夜)，然后放掉下层酸液，重复 1-2 次， 加 2％硫酸钠 40，30，30 毫升洗至中性，加入无水硫酸钠 5 克，定容至 l00 毫升， 并加入内标环氧七氯 lOml，进入气相色谱仪进行测定。 (4)测定 a、将配制的各种浓度标准 c 液进入色谱仪得到各种浓度的标准色谱图山峰顺 序为 α-666，β-666，γ-666，δ-666，环氧七氯 PP`-DDE，0P-DDT，PP`-DDD，PPl-DDT， 并量其峰高值。 b、取净化液适量(一般在 0.2UL-lOul 之间，使其响应值在检测器线性范围内) 注入气相置谱仪内，并选取与样品峰高相近的标准农药峰高代入下式。 计算： 农药残留含量 PPm
2、仪器 103 型气相比色谱仪，电子捕获检定器。 色谱柱长 1.2 米，内径 3 毫米螺旋形不锈钢柱固定液用 OV-173％及 QF15％混 合液。 柱体 Chromosorbw 80-100 目 柱温 190℃，载气高纯 N2 检测温度 210℃，载气流 40ml／分 汽化温度 210℃。 四、高脂样品的提取： (1)消化： 称取均样 10 克于 200 毫升园底瓶中，加入 35 毫升高氯酸冰醋酸(1：1)混酸 于 90℃水浴上加热(加热时要不停地振摇以免结成炭粒)，直到样品完全溶解为 止，溶液呈紫红色液体，冷却，加水 35 毫升(水：酸＝1：1)，如溶液发热仍需 冷却。 (2)抽提： 用(bp60-90℃)石油醚，以 40，30，30 毫升萃取 3 次，合并萃取液，通过无水 硫酸钠柱子，抽提液全量为 100。 (3)净化： 将 l00 毫升石油醚抽提倒入 250 毫升分液漏半中，加 10 毫升浓硫酸(酸：石油 醚＝1：l0)，轻轻振摇，静置分层(放置过夜)，然后放掉下层酸液，重复 1-2 次， 加 2％硫酸钠 40，30，30 毫升洗至中性，加入无水硫酸钠 5 克，定容至 l00 毫升， 并加入内标环氧七氯 lOml，进入气相色谱仪进行测定。 (4)测定 a、将配制的各种浓度标准 c 液进入色谱仪得到各种浓度的标准色谱图山峰顺 序为 α-666，β-666，γ-666，δ-666，环氧七氯 PP`-DDE，0P-DDT，PP`-DDD，PPl-DDT， 并量其峰高值。 b、取净化液适量(一般在 0.2UL-lOul 之间，使其响应值在检测器线性范围内) 注入气相置谱仪内，并选取与样品峰高相近的标准农药峰高代入下式。 计算： 农药残留含量 PPm
按下式用内标校正。 残留量： PPM＝(H／H2 ) × (C／W) X (HO／HO`) X (WO／CO`) H／H`：样品中该组分的峰高和标准液中该组分峰高。 HO／HO：标样中内标的峰高和试样中内标的峰高。 · C／W：注入到色谱仪中的标准液所含该组分的浓度(ug／m1)和样品的重量。 WO／CO ,：样品 W 中所加人的内标重量(ug)和标准液中所含的内标浓度 （ug/ml）
按下式用内标校正。 残留量： PPM＝(H／H2 ) × (C／W) X (HO／HO`) X (WO／CO`) H／H`：样品中该组分的峰高和标准液中该组分峰高。 HO／HO：标样中内标的峰高和试样中内标的峰高。 · C／W：注入到色谱仪中的标准液所含该组分的浓度(ug／m1)和样品的重量。 WO／CO ,：样品 W 中所加人的内标重量(ug)和标准液中所含的内标浓度 （ug/ml）