实验十六 酱油中山梨酸、苯甲酸的测定 一、目的与要求： 1、掌握酱油、水果汁、果酱中山梨酸、苯甲酸的测定原理及方法。 二、原理： 样品酸化后，用乙醚提取山梨酸，苯甲酸。将样品提取液浓缩，点于浆酰胺 薄层板上，展开,显色后，根据薄层板上山梨酸，苯甲酸的比移值与标准比较定 性，并可进行概略定量。 三、试剂与仪器： 1、异丙醇 2、正丁醇 3、石油醚沸程：30-60℃。 4、乙醚：不含过氧化物 5、氨水 6、6N 盐酸：取 100 毫升盐酸 7、无水乙醇。 8、聚酰胺粉：200 目。 9、山梨酸标准溶液：精密称取 0.2000 克山梨酸，用少量乙醇溶解后移入 100 毫升容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于 200 毫克山梨酸。 10、苯甲酸标准溶液：精密称取 0.2000 克苯甲酸，用少量乙醇溶解后移入 100 毫升容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于 2 毫克苯甲酸。 11、展开剂 (1)正丁醇-氨 K-无水乙醇(7：1：2) (2)异丙醇-氨水-无水乙醇(7：1：2) 12、显色剂：O.04％溴甲酚紫的 50％乙醇溶液，用 0.1N 氢氧化钠溶液 调至 PH=8。 13、4％氯化钠酸性溶液：于 4％的氯化钠溶液中加少量 6N 盐酸酸化。 14、吹风机。 15、层析缸。 16、玻璃板：10 X 18cm
实验十六 酱油中山梨酸、苯甲酸的测定 一、目的与要求： 1、掌握酱油、水果汁、果酱中山梨酸、苯甲酸的测定原理及方法。 二、原理： 样品酸化后，用乙醚提取山梨酸，苯甲酸。将样品提取液浓缩，点于浆酰胺 薄层板上，展开,显色后，根据薄层板上山梨酸，苯甲酸的比移值与标准比较定 性，并可进行概略定量。 三、试剂与仪器： 1、异丙醇 2、正丁醇 3、石油醚沸程：30-60℃。 4、乙醚：不含过氧化物 5、氨水 6、6N 盐酸：取 100 毫升盐酸 7、无水乙醇。 8、聚酰胺粉：200 目。 9、山梨酸标准溶液：精密称取 0.2000 克山梨酸，用少量乙醇溶解后移入 100 毫升容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于 200 毫克山梨酸。 10、苯甲酸标准溶液：精密称取 0.2000 克苯甲酸，用少量乙醇溶解后移入 100 毫升容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于 2 毫克苯甲酸。 11、展开剂 (1)正丁醇-氨 K-无水乙醇(7：1：2) (2)异丙醇-氨水-无水乙醇(7：1：2) 12、显色剂：O.04％溴甲酚紫的 50％乙醇溶液，用 0.1N 氢氧化钠溶液 调至 PH=8。 13、4％氯化钠酸性溶液：于 4％的氯化钠溶液中加少量 6N 盐酸酸化。 14、吹风机。 15、层析缸。 16、玻璃板：10 X 18cm
17、微量注射器：10 微升，100 微升。 18、喷雾器。 四、操作方法 1、样品提取 称取 2.5 克事先混合均匀的样品，置于 25 毫升带塞量筒中，加 0.5 毫升 6N 盐 酸酸化，用 15、10 毫升乙醚提取两次，每次振摇 1 分钟，将上层醚提取液吸人 另一个 25 毫升带塞量筒中，合并乙醚提取液。用 3 毫升 4％氯化钠酸性溶液洗 涤两次，静止 15 分钟，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤人 25 毫升容量瓶中。 加乙醚至刻度混匀，吸取 l0.0 毫升乙醚提取液分两次置于 10 毫升带塞离心管中， 在约 40 (2 的水浴上挥发干，加入 0.10 毫升乙醇溶解残渣，备用。 2、测定 (1)聚酰胺粉板的制备：称取 1.6 克聚酰胺粉，加 0.4 克可溶性淀粉加约重 5 毫 升，研磨 3-5 分钟，立即倒入涂布器内制成 10 X 8cm、厚度 0.3mm 的薄层板两 块，于室温干燥后保存，于 80℃干燥 1 小时，取出，置于干燥器中保存。 (2)点样：在薄层板下端 2cm 的基线上，用微量注射器点 1 微升，2 微升样品 液，同时各点 1 微升、2 微升山梨酸、苯甲酸标准溶液。 (3)展开与显色：将点样后的薄层板放人预先盛有展开剂[(1)或(2)]的展开槽内， 展开槽周围贴有滤纸，待溶剂前沿上展至 lOcm，取出挥干，喷显色剂、斑点成 黄色，背景为蓝色。样品中所含有山梨酸、苯甲酸的量与标准斑点比较定量(山 梨酸、苯甲酸的比移值依次为 0.82，0.73)。 A×1000 计算： X=- 10 V2 m×- × - × 1000 25 V1 X：样品中山梨酸(苯甲酸)的含量，g／kg； A：测定用样品液中山梨酸(苯甲酸)的含量，mg； M：样品质量，g； Vl：加入乙醇的体积，ml．
17、微量注射器：10 微升，100 微升。 18、喷雾器。 四、操作方法 1、样品提取 称取 2.5 克事先混合均匀的样品，置于 25 毫升带塞量筒中，加 0.5 毫升 6N 盐 酸酸化，用 15、10 毫升乙醚提取两次，每次振摇 1 分钟，将上层醚提取液吸人 另一个 25 毫升带塞量筒中，合并乙醚提取液。用 3 毫升 4％氯化钠酸性溶液洗 涤两次，静止 15 分钟，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤人 25 毫升容量瓶中。 加乙醚至刻度混匀，吸取 l0.0 毫升乙醚提取液分两次置于 10 毫升带塞离心管中， 在约 40 (2 的水浴上挥发干，加入 0.10 毫升乙醇溶解残渣，备用。 2、测定 (1)聚酰胺粉板的制备：称取 1.6 克聚酰胺粉，加 0.4 克可溶性淀粉加约重 5 毫 升，研磨 3-5 分钟，立即倒入涂布器内制成 10 X 8cm、厚度 0.3mm 的薄层板两 块，于室温干燥后保存，于 80℃干燥 1 小时，取出，置于干燥器中保存。 (2)点样：在薄层板下端 2cm 的基线上，用微量注射器点 1 微升，2 微升样品 液，同时各点 1 微升、2 微升山梨酸、苯甲酸标准溶液。 (3)展开与显色：将点样后的薄层板放人预先盛有展开剂[(1)或(2)]的展开槽内， 展开槽周围贴有滤纸，待溶剂前沿上展至 lOcm，取出挥干，喷显色剂、斑点成 黄色，背景为蓝色。样品中所含有山梨酸、苯甲酸的量与标准斑点比较定量(山 梨酸、苯甲酸的比移值依次为 0.82，0.73)。 A×1000 计算： X=- 10 V2 m×- × - × 1000 25 V1 X：样品中山梨酸(苯甲酸)的含量，g／kg； A：测定用样品液中山梨酸(苯甲酸)的含量，mg； M：样品质量，g； Vl：加入乙醇的体积，ml．
V2：测定时点样的体积，ml； · 10：测定时吸取乙醚提取液的体积，ml； 25：样品乙醚提取液总体积，m1。 注：此方法还可以同时测定果酱、果汁中的糖精
V2：测定时点样的体积，ml； · 10：测定时吸取乙醚提取液的体积，ml； 25：样品乙醚提取液总体积，m1。 注：此方法还可以同时测定果酱、果汁中的糖精