全程设计 章未核心素养整合
章末核心素养整合
导航、 知识体系构建 专题归纳突破
导航 知识体系构建 专题归纳突破
导航 知识体系构建 DNA的粗提取与鉴定 实验 DNA片段的扩增及电泳鉴定 限制性内切核酸酶 基 DNA连接酶 工 载体 在农牧业方面的应用 基因工程 应 在医药卫生领域的应用 目的基因的筛选与获取 基因表达载体的构建 在食品工业方面的应用 将目的基因导入受体细胞 本操作程 目的基因的检测与鉴定 在医药工业方面的应用 蛋白质工程的概念和原理 蛋白质工程 在其他工业方面的应用 在农业方面的应用
导航 知识体系构建
导航 专题归纳突破 专题限制酶的选择方法 1.根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类。 Pst T Sma I Pst I 抗病基因 Sma T EcoR I
导航 专题归纳突破 专题 限制酶的选择方法 1.根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类
()应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，如上图可 选择PstI。 (2)不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶，如上图 不能选择SmmI。 (3)为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使 用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如上图也可选择用 PstI和EcoR I两种限制酶，但要确保质粒上也有这两种酶的 切割位点，且标记基因内部没有这两种酶的切割位点
导航 (1)应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶,如上图可 选择PstⅠ。 (2)不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶,如上图 不能选择SmaⅠ。 (3)为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使 用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如上图也可选择用 PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶,但要确保质粒上也有这两种酶的 切割位点,且标记基因内部没有这两种酶的切割位点
2.根据质粒的特点确定限制酶的种类。 Pst I ()所选限制酶要与切割目的基因的 标记 EcoR I 基因 限制酶一致，以确保具有相同的末端。 Sma (2)质粒作为载体必须具备标记基因等，因此所选择的限制 酶应不能切割质粒上的所有标记基因，即至少要保留一个标 记基因，用于重组DNA的鉴定和筛选，如上图中限制酶SMI 会破坏标记基因
导航 2.根据质粒的特点确定限制酶的种类。 (1)所选限制酶要与切割目的基因的 限制酶一致,以确保具有相同的末端。 (2)质粒作为载体必须具备标记基因等,因此所选择的限制 酶应不能切割质粒上的所有标记基因,即至少要保留一个标 记基因,用于重组DNA的鉴定和筛选,如上图中限制酶SmaⅠ 会破坏标记基因
导航 【典型例题】下表中列出了几种限制酶的识别序列及其切 割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的切割位点。下列 相关说法错误的是( 限制酶 BamH I HindⅢ EcoR I Sma I 识别序列及 GGATCC AAGCTT GAATTC CCCGGG 切割位点 CCTAGG TTCGAA CTTAAG GGGCCC ↑ ↑
导航 【典型例题】下表中列出了几种限制酶的识别序列及其切 割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的切割位点。下列 相关说法错误的是( ) 限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ 识别序列及 切割位点
A.一个图1所示的质粒分子经 目的 抗生素 BamH I EcoR I 基因 EcoR I 抗性基因 HindⅢ II本亚 外源 SaI切割后，含有4个游离的 Sma I 质粒 +EcoR I DNA BamH I Sma I HindlⅢ 磷酸基团 图1 图2 B.用图1所示的质粒和图2所示的目的基因构建重组质粒，不 能使用SmaI切割 C.图2中为防止酶切后含目的基因的DNA片段自身环化，不 能使用EcoR I D.为了获取重组质粒，最好用BamH I和HindⅢ同时切割 质粒和外源DNA 答案：A
导航 A.一个图1所示的质粒分子经 SmaⅠ切割后,含有4个游离的 磷酸基团 B.用图1所示的质粒和图2所示的目的基因构建重组质粒,不 能使用SmaⅠ切割 C.图2中为防止酶切后含目的基因的DNA片段自身环化,不 能使用EcoR Ⅰ D.为了获取重组质粒,最好用BamH Ⅰ 和Hind Ⅲ同时切割 质粒和外源DNA 答案:A
解析：图1所示质粒分子经SaI切割后形成2个平末端，根 据DNA分子的两条链反向平行的特点可知，切割后应含有2个 游离的磷酸基团，A项错误。用SMI切割会破坏目的基因和 质粒中的标记基因，B项正确。如果用EcoR I处理目的基因， 由于两端含有相同的黏性末端，则可能发生自身环化，用 BamH I和HindⅢ两种限制酶同时切割质粒和外源DNA即可 解决这一问题，C、D两项正确
导航 解析:图1所示质粒分子经SmaⅠ切割后形成2个平末端,根 据DNA分子的两条链反向平行的特点可知,切割后应含有2个 游离的磷酸基团,A项错误。用SmaⅠ切割会破坏目的基因和 质粒中的标记基因,B项正确。如果用EcoRⅠ处理目的基因, 由于两端含有相同的黏性末端,则可能发生自身环化,用 BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时切割质粒和外源DNA即可 解决这一问题,C、D两项正确
以梦为马 不负韶华！
以梦为马， 不负韶华！