第六章种子检验原理和技术 本章教学时数：8学时（第25-32讲） 第四节种子发芽试验 (第28讲) 一、种子发芽试验的目的意义 1.种子发芽力是种子播种品质的最主要指标之一，是指种子在 适宜条件下发芽并长成正常幼苗的能力，通常用发芽势和发芽率表 示。发芽势是指种子发芽试验初期（规定日期）正常发芽的种子占供试 种子数的百分率：发芽率是指种子发芽试验终期（规定日期内）全部正 常发芽种子数占供试种子数的百分率。 2.目的 测定种子批的最大发芽潜力，据此可以比较不同种子批的质量， 及田间播种价值。 3.意义 第一，播前进行发芽试验，可选用发芽力高的种子播种，保证苗 齐、苗壮、苗全，从而获得高产。 第二，调种前进行发芽试验，可防盲目调运，节约人力，物力。 第三，收购前进行发芽试验，可正确进行种子分级定价。 第四，贮藏期做好发芽试验，判断保管技术的优劣。 第五，通过发芽试验，可正确计算种子用价及播种量 二、发芽试验设备和用品 1.发芽床这是安放种子，并提供水分的衬垫物，常见有纸床 和砂床，此外还有纱布土壤等。 2.发芽箱是种子发芽的场所，可提供种子发芽时所要求的温 度、水分和光照，较为理想的发芽箱应保温性能好，控温准确，箱内
温度均匀，操作简便耐用。 3.发芽容器 要求：发芽容器透明、保湿、无毒，具有一定的种子发芽和发育 的空间，确保一定的氧气供应。 4.数种设备 活动数种板；真空数种器 5.其它用品和化学试剂 如喷水器：化学试剂如GA,NOs,KNO,H0等用于破除种子休 眠处理：杀菌剂用于易发霉种子样品的消毒、杀菌。 三、破除休眠种子的方法 (一)破除生理休眠方法 (1)预先冷冻试验前，将各重复种子放在湿润的发芽床上，通 常在5一10℃下预冷处理，保持7时间，然后在规定温度下进行发芽。 但在有些情况下，需要延长预先冷冻时间或重新冷冻。乔木和灌木通 常在1一5℃下预先冷冻一段时间，冷冻时间随林木种类而异。 (2)硝酸处理水稻休眠种子可用硝酸溶液0.1mo1/L浸种16~ 24h,冲洗，然后置床发芽。 (3)硝酸钾处理硝酸钾的处理，适用于禾谷类、茄科等许多种 子。在发芽开始时，发芽床可用0.2%（血/V)的硝酸钾溶液湿润。在 试验期间，水分不足时可加水湿润。 (4)亦霉酸(GA)处理燕麦、大麦、黑麦和小麦种子用0.05%(m /V)GA3溶液湿润发芽床。当种子休眠较浅时用0.02%(m/V)浓度， 当休眠深时须用0.1%(m/V)浓度。芸苔属可用0.01%或0.02%(m/V) 浓度的溶液。 (⑤)双氧水处理(GB)可用于小麦、大麦和水稻休眠种子的处 理。用浓双氧水[29%(W/V)]处理时，小麦浸种5min,大麦浸种10~ 20min,水稻浸种2h。用淡双氧水处理时，小麦用1%(W/V)浓度， 大麦用1.5%(V/V)浓度，水稻用3%(W/)浓度，均浸种24h。用浓
双氧水处理后，须马上用吸水纸吸去沾在种子上的双氧水，再置床发 芽。 (6)去稃壳处理(GB)水稻用出糙机脱去稃壳，有稃大麦剥去 胚部稃壳（外稃），菠菜剥去果皮或切破果皮，瓜类嗑开种皮。 (7)加热干燥将发芽试验的各重复种子放在不超过30一35℃的 循环气流加热处理7，对一些热带和亚热带的种，可采用40一50℃的 预先加热温度（如花生40℃，水稻50℃）。 表6.1各种作物种子加热干燥的温度和时间(GB) 作物名称 温度（℃） 时间(d) 大麦、小 30-35 3-5 高粱 30 2 木稻 5-7 花生 40 14 大豆 30 0.5 向山葵 30 棉花 10 1 烟 30-40 7-10 胡萝卜芹菜、菠菜、洋葱 30 3-5 黄瓜、甜瓜、西瓜 (8)聚乙烯袋密封 在发芽试验结束，仍有较多的新鲜不发 芽种子（如三叶草属）时，应将种子密封在大小适宜的聚乙烯袋中重 新试验，通常可诱导这些种子发芽 (二)破除硬实的方法 (1)开水烫种适用于棉花和豆类的硬实，发芽试验前将种子用 开水烫2min,再行发芽。 (2)机械损伤小心地把种皮刺穿、削破、锉伤或用砂皮纸摩擦。 机械损伤最适宜的部位是靠近子叶顶端的种皮部分。豆科硬实可用针 直接刺入子叶部分，也可用刀片切去部分子叶。 (3)酸液腐蚀 有些种类如翼豆属、臂形草属，将其放在浓硫 酸中对腐蚀种皮是有效的。种子经腐蚀后，必须将其放入流水中充分 洗涤，然后进行发芽试验
(三)除去抑制物质的方法 (1)预先洗涤甜菜、菠菜等种子单位的果皮或种皮内有发芽 抑制物质时，可把种子浸在温水或流水中预先洗涤，甜菜复胚种子洗 涤2h,遗传单胚种子洗涤4h,菠菜种子洗涤1~2h。然后将种子 干燥，进行种子干燥时最高温度不得超过25℃。欧洲种子检验室配 有甜菜种球洗涤和烘干设备。 (2)除去种子周围构造有些种子除去其外表的构造可促进发 芽，如禾本科中某些种的刺毛状总苞片、内外稃等。 (四)种子消毒 仅用于花生和甜菜样品。在发芽置床前，采用杀菌处理。 四、控制发芽条件 1.水分由于种子大小和种类的差别，所需提供水分多少也有 差异：发芽床的性质和大小不同，对于水分的持水能力也不同。因而 一般小粒种子规定用纸床，可将其浸入水中，吸湿后沥去多余的水即 可将种子摆上发芽。大粒种子规定砂质或纸卷作发芽床，在砂中加入 干砂饱和含水量的80%的水分，纸卷则浸湿后沥去多余水分即可。中 粒种子采用纸床或砂床，但砂中加水为饱和含水量的60%，如用土壤 作发芽床，加水至握土粘成团，再手指轻轻一压就碎为宜，发芽期间 发芽床必须保持湿润，注意及时补充水分。这些水分应纯净，无毒无 害，PH值为6.0-7.5。 2.温度有利于种子发芽的最适温度有恒温和变温两种，所谓发 芽温度实际上指发芽床上种子所处平面上的温度，而不是指空气或水 温。耐寒作物如麦类，蚕豆，豌豆，甜菜一般采用20℃恒温。喜温 作物如水稻、玉米、绿豆、大豆、棉花，则常用20-30℃变温方法好， 亦可使用25℃恒温，但芸苔属作物如大白菜、甘蓝、油菜则采用15-25 ℃变温或20℃恒温发芽。变温时通常应保持低温16h及高温8h。对 于非休眠种子，可以在3h内逐渐变温，如是休眠种子，应在1h或更
短时间内完成急剧变温或将试验移到另一温度较低的发芽箱内。 3.光或黑暗不同作物种子发芽对光反应不同，大部分作物种子 如玉米，麦类，大豆和棉花，无论有无光照都可发芽。有些作物种子 如烟草，莴苣、芥菜必须有光才能发芽：发芽时光照的光照强度为 750-1250LX,如在变温条件下发芽，光照应在8h高温时进行：也有 些植物如黑种草属，苋属发芽时要严格控制黑暗条件。 4.氧气一般空气中有足够的氧气，但发芽时水分过多易造成氧 不足。因此应注意换气，尤其是在纸卷和砂床中应注意，纸卷须相当 疏松，砂床时覆盖种子的砂不要紧压。 五、发芽实验方法 (一)选用发芽床和调节湿度 按表4.2各种作物种子发芽技术规定，选用其中最适合的发芽 床。 表6.2农作物种子的发芽技术规定 种（变种）名 发芽床 温度，℃ 初次计数木次计数附加说明，包括破除 天数，d 天数，d 休眠的建议 1.洋葱 TP:BP:S 20:15 12 预先冷冻 2.葱 TP:BP:S 20:15 6 12 预先冷冻 3.非葱 TP:B即：S 20:15 6 14 预先冷冻 4.细香葱 TP:BP:S 20:15 6 14 预先冷冻 5.非染 TP 20-30:20 6 14 预先冷冻 6.苑菜 TP 20-30:20 4-5 14 预先冷冻：KNO 7.芹巢 TP 15-25:20:1510 21 预先冷冻 8.根片菜 TP 15-25:20:1510 21 预先冷冻 9.花生 BP:S 20-30:25 5 10 去壳：预先加温(40) 10.牛蒡TP:BP 20-30:20 14 35 模先冷冻：四唑染色 (二)数取试样 从经充分混合的净种子中，用数种设备或手工随机数取400粒种
通常以100粒种子为一次重复，大粒种子或带有病原菌的种子， 可以再分为50粒、甚至25粒为一副重复 (三)置床前破除休眠处理 按表6.2第七栏破除休眠的建议 (四)置床和粘放标签 要求是种子试样均匀分布在发芽床上，每粒种子之间留有种子直 径5倍以上的间距，以防止发霉种子的互相感染和保持足够的生长空 间，每粒种子应良好接触水分，使发芽一致。 在发芽皿或其他容器底盘的侧面贴上或内侧放上标签，注明置床 日期、样品编号、品种名称及重复次数等，然后盖好容器盖子或套 薄膜塑料袋。 (五)置床后破除休眠处理 按表6.2第七栏说明，有些种类种子，如葱属、芸苔属等，按上 节破除休眠的方法进行预先冷冻处理，然后移置规定条件发芽培养。 (六)培养和检查管理 按表6.2规定的发芽条件」 发芽床应始终保持湿润，切忌断水，也不能水分过多或过干，以 保持适宜的发芽水分。 温度应保持在所需温度的土2℃范围内。 如发现霉南滋生，应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5%时， 应调换发芽床，如发现腐烂死亡种子，则应将其除去并记载。 还应注意氧气的供应情况，避免因缺氧而使正常发芽受影响 (七)试验持续时间和观察记载 试验持续时间：详见表6.2。试验前或试验间用于破除休眠处理 所需时间不作为发芽试验时间的一部分
如果样品在规定试验时间内只有几粒种子开始发芽，则试验时间 可延长7d,或延长规定时间的一半。反之，如果在规定试验时间结 束前，样品已达到最高发芽率，则该试验可提前结束。 观察记载：每株幼苗都必须按规定的标准进行鉴定，鉴定要在 主要构造已发育到一定时期进行。根据种的不同，试验中绝大部分幼 苗应达到：子叶从种皮中伸出（如莴苣属）、初生叶展开（如莱豆属）、 叶片从胚芽鞘中伸出（如小麦属）。 在初次计数时，把发育良好的正常幼苗应从发芽床中拣出，对可 疑的或损伤、畸形或不均衡的幼苗，通常留到末次计数。严重腐烂的 幼苗或发霉的种子应从发芽床中除去，并随时增加计数。 末次计数时，按正常幼苗、不正常幼苗，新鲜不发芽种子或硬实 和死种子分类计数和记载。 (八)重新试验 (1)怀疑种子有休眠（即有较多的新鲜不发芽种子），可采用表4.2 或上节破除休眠所述的方法进行试验，将得到的最佳结果填报，应注 明所用的方法。 (2)由于真菌或细菌的蔓延而使试验结果不一定可靠时，可采用 砂床或土壤进行试验。如有必要，应增加种子之间的距离， (3)当正确鉴定幼苗数有困难时，可采用表4.2中规定的一种或 几种方法在砂床或土壤上进行重新试验。 (4)当发现试验条件、幼苗鉴定或计数有差错时，应采用同样方 法进行重新试验。 (⑤)当100粒种子重复间的差距超过表4.3最大容许差距时，应 采用同样的方法进行重新试验。如果第二次结果与第一次结果相 致，即其差异不超过表4.4中所示的容许差距，则将两次试验的平均 数填报在结果单上。如果第二次结果与第一次结果不相符合，其差异 超过表4.4所示的容许差距，则采用同样的方法进行第三次试验，填 报符合要求的结果平均数
(九)结果计算和报告 试验结果以粒数的百分率表示。当一个试验的4次重复（每个重 复以100粒计，相邻的副重复合并成100粒的重复)，正常幼苗百分 率都在最大容许差距内（表4.3），则其平均数表示发芽百分率。不正 常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子的百分率按4次重复平均数计算。 正常幼苗、不正常幼苗和未发芽种子百分率的总和必须为100%， 平均数百分率修约到最近似的整数，修约0.5进入最大值中。 填报正常幼苗、不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子的 百分率。 假如其中任何一项结果为零，则将符号“-0-”填入该格中。同 时还须填报采用的发芽床和温度、试验持续时间以及为促进发芽所采 用的处理方法。 六、幼苗鉴定 (一)正常幼苗 指在良好土壤及适宜水分、温度和光照条件，具有继续生长发育 成为正常植株的幼苗。凡符合下列之一者为正常幼苗： 1.完整幼苗一株完整的幼苗按所检验的种不同，表现有下列 些主要构造的特定组合。 (1)一个发育良好的根系。 (2)一个发育良好的幼苗中轴 (3)具有特定数目的子叶。 (4)具有展开，绿色的初生叶。 (⑤)具有一个项芽或苗端，其发育程度因所检验的种而不同。 (6)在禾本科植物中有一个发育良好，直立的芽鞘，其中包着 片绿叶延伸到项端，最后从芽鞘中伸出。 2.带有轻微缺陷的幼苗，下列缺陷可以认为是轻微的： (1)初生根局部损伤，或生长稍缓
(2)初生根生长缺陷，但次生根发育良好，特别是豆科中一些大 粒种子的属（如菜豆属，豌豆属，花生屈），禾本科一些属（如玉米属、 高梁属、稻属)、葫芦科所有属和锦葵科所有属。 (③)在燕麦属、大麦属、黑麦属、小麦属和小黑麦属中只有一条 强壮的种子根。 (4)下胚轴，上胚轴或中胚轴局部损伤。 (⑤)子叶局部损伤，但子叶保留一半或一半以上且幼苗项端或其 周围组织没有明显的损伤或腐烂。 (6)双子叶植物仅有一片正常子叶，但其幼苗顶端或其周围组织 没有明显的损伤或腐烂。 (7)初生叶局部损伤（保留一半或一半以上）。 (8)顶芽没有明显的损伤或腐烂，有一片正常初生叶，如菜豆属。 或具有三片初生叶而不是两片（叶面积大于或等于一半）如菜豆属。 (9》在菜豆属中初生叶形状正常，大于正常大小的四分之。 (10)芽鞘局部损伤，从顶端开裂（裂缝长不超过芽鞘的1/3）或受 内外稃或果皮阻挡芽鞘轻度扭曲或形成环状。 (11)芽鞘内的绿叶，没有延伸到芽鞘顶端，但至少要达到芽鞘的 一半。 3.次生感染的幼苗 由真菌或细菌感染引起，使幼苗主要构造发病和腐烂，但有证据 表明病源不来自种子本身。 (二)不正常幼苗 指生长在良好土壤及适宜水分，温度和光照条件下，不能继续生 长发育成为正常植株的幼苗，包括受损伤的幼苗，畸形或不匀称的幼 苗和腐烂苗三类。受损伤的幼苗是由机械处理、加热、干燥、昆虫损 害等外部因素引起，使幼苗构造残缺不全或受到严重损伤，以致于 不能均衡生长；畸形或不匀称幼苗是由于内部因素引起生理紊乱，幼 苗生长细弱，或存在生理障碍，或主要构造畸形，或不匀称者。腐烂
苗是由初生感染（病源来自种子本身）引起，使幼苗主要构造发病和腐 烂，并妨碍其正常生长者。在实际过程中，凡幼苗带有下列一种或 种以上的缺陷则列为不正常幼苗。 1.初生根发育短粗、残缺、停滞、缺失、破裂、纤细、缩缢、卷 缩在种皮内，负向地性生长，水肿状及由初生感染所引起的腐烂等 2.没有或仅有一条生长力弱的种子根。 3.上、中、下胚轴缩短变粗，深度破裂、缺失、缩缢、严重扭曲， 形成环状或螺旋形，水肿状，以及由初生感染所引起的腐烂等。 4.子叶肿胀卷曲，畸形、变色、坏死、断裂或缺失（一半以上） 及由初生感染所引起的腐烂。 5.初生叶畸形，变色、坏死、缺失（或损伤一半以上）或因初生感 染而腐烂，及初生叶形状正常，但小于正常叶片大小的四分之一。 6.顶芽及周围组织畸形、损伤、或由初生感染所引起的腐烂等 7.胚芽鞘畸形，损伤、残缺、严重扭（弯）曲，基部开裂，形成环 状或螺旋形及由初生感染所引起腐烂等。 8.第一叶缺失，撕裂，畸形或延伸长度不到胚芽鞘一半。 9.整个幼苗畸形、断裂、纤细、黄化或白化、子叶比根先长出或 由初生感染所引起的腐烂。 (三)末发芽种子 这类种子包括硬实，新鲜不发芽种子，死种子和其他类型。 1.硬实种子在标准发芽条件下不能吸水，表面坚硬，这是休眠 的一种形式，常见于豆科植物里。 2.新鲜不发芽种子在标准发芽条件下能吸水，但不能进一步发 育，种子表面有点硬，有弹性，这主要是由生理休眠引起。 3.死种子常表现柔软、褪色、发霉、无幼苗生长迹象。必须强 调，即使种子腐烂，但初生根微露，也应计数为不正常幼苗。 4.其他类型主要是指空种子，无胚种子和虫蛀种子