实验一、小眼腹腔注射简箭毒碱印的测定 Experiment 1.Determination of Cl-Tubocurarine's median effective dose (ED) 【相美理论】 1.什么叫量反应？质反应？D属于什么反应资料？ 量反应是指在个体身上反应的强度，可以用连续性的数值米表示，例如血压，成量等。 质反应是指群体中所观察到的某一效应的出现，如生或死，有效或无效等，以性反应率或 百分数来表示（全或无，阳性率）。团是质反应的参数。 2,什么是EDa:L,治疗指数？ 能使辱体中有半数个体出现某一效应的剂量，称为半数效应量，若此效应为有效，则 为半数有效量D,若此效应为死亡时，则为半数致死量1D。: 治疗指数=L/EDTI。该值越大越好，说明药物越安全。 可用机半单位正线法或点斜法求出D,D:L,,D 3,量效曲线， 效应个 量反应 长尾s型 对称的5型 Lg利用 质反应 长尾s型 对将的S型 4.即测定方法：应用点斜剂量J该方法测定即时，8剂量各须符合以下5点 要求： (1)动物以5一8组为宜： (2》每组动物数领一政： (3)各组给药剂量应为等比数列： (4)各组给药剂量的公比r·1.1一1.6： (5)最大剂量(D)组的阳性反应率领≥8%。最小剂量(D)组的阳性反应率须 20%. 【实验目的】 了解D的测定方法、原理、计算过程与意文。 【实验对象】 小鼠（足明种M),雌接各半 【仪器和药品】 铁丝网，铁架台，天平，注射器。筒箭毒碱（根据实际需求常规注则体积。一取为 0.2ml/10g体重，进行配制)
实验一、小鼠腹腔注射筒箭毒碱 ED50的测定 Experiment 1. Determination of Cl-Tubocurarine’s median effective dose （ED50） 【相关理论】 1．什么叫量反应？质反应？ED50属于什么反应资料？ 量反应是指在个体身上反应的强度，可以用连续性的数值来表示，例如血压、尿量等。 质反应是指群体中所观察到的某一效应的出现，如生或死，有效或无效等，以阳性反应率或 百分数来表示（全或无，阳性率）。ED50是质反应的参数。 2．什么是 ED50，LD50，治疗指数？ 能使群体中有半数个体出现某一效应的剂量，称为半数效应量，若此效应为有效，则 为半数有效量 ED50，若此效应为死亡时，则为半数致死量 LD50。 治疗指数= LD50/ ED50=TI，该值越大越好，说明药物越安全。 可用机率单位正规法或点斜法求出 LD1 ，ED99 ；LD5 ，ED95。 3．量效曲线。 4．ED50测定方法：应用点斜法。应用该方法测定 ED50时，实验设计必须符合以下 5 点 要求： （1）动物以 5～8 组为宜； （2）每组动物数须一致； （3）各组给药剂量应为等比数列； （4）各组给药剂量的公比 r = 1.1～1.6； （5）最大剂量（Dmax）组的阳性反应率须≥80%，最小剂量（Dmin）组的阳性反应率须≤ 20%。 【实验目的】 了解 ED50的测定方法、原理、计算过程与意义。 【实验对象】 小鼠（昆明种 KM），雌雄各半 【仪器和药品】 铁丝网，铁架台，天平，注射器，筒箭毒碱（根据实际需求常规注射体积，一般为 0.2ml/10g 体重，进行配制）。 量反应 剂量 长尾 S 型 效应 Lg 剂量 对称的 S 型 效应 质反应 剂量 长尾 S 型 累加频率 Lg 剂量 对称的 S 型 累加频率
【实验方法】 1.预实验。目的是为了找出符合上述点斜法要求5)的D和D阳性反应判定标准： 20i内小佩落下3次（注意排除因互相拥挤面落下所适成的假阳性）. 2.确定组数()后，根据几和几，计算各组应给予的剂量，注意公比r应在上述 要求的范围内。几=r·D 即r=- D =1.1、1.6 分别计算出各组应注射的剂量，见下表： Group 2 No. Dose Dnin R.Dnin r.Dain r'.Duin r'.Duin Drax "r.Dnin 3,正式实验 (1)简选小鼠：将小鼠故在铁幢网上，观察10分钟，能坚特不掉落的即为合格，可以 参与实验。此步筛选的目的在于排除假阳性： (2)称重、标记 (3)给药观察：腹乾注射筒能青城。每组分别给予相应的剂量。 (4)计算性率：阳性反应标准：给药后20分钟内自铁丝网上掉落3次者为阳性。 记录表格示例1《每组用) No. Weight of Yolure of Time: Time:end Tines of +/-* body (g) injection injection of falling (al) cbservatio down 2 3 4 5 7 8 9 10 ◆+：positive:-:negative 记录表格示例2（合计）： Groups N中 Dose Volune of injection No.of P%中 (mz/kg) ml/10gbo事e1ht) reaction 1 10 2 10 10
【实验方法】 1．预实验，目的是为了找出符合上述点斜法要求 5）的 Dmax和 Dmin。阳性反应判定标准： 20min 内小鼠落下 3 次（注意排除因互相拥挤而落下所造成的假阳性）。 2．确定组数（n）后，根据 Dmax和 Dmin，计算各组应给予的剂量，注意公比 r 应在上述 要求的范围内。Dmax= rn ·D min 即 ( 1) min = n− max D D r = 1.1 ~ 1.6 分别计算出各组应注射的剂量，见下表： Group No. 1 2 3 4 5 6 … Dose Dmin R·Dmin r2 ·Dmin r3 ·Dmin r4 ·Dmin Dmax = r5 ·Dmin … 3．正式实验： （1）筛选小鼠：将小鼠放在铁丝网上，观察 10 分钟，能坚持不掉落的即为合格，可以 参与实验。此步筛选的目的在于排除假阳性； （2）称重、标记； （3）给药观察：腹腔注射筒箭毒碱。每组分别给予相应的剂量。 （4）计算阳性率：阳性反应标准：给药后 20 分钟内自铁丝网上掉落 3 次者为阳性。 记录表格示例 1（每组用） No. Weight of body (g) Volume of injection (ml) Time: injection Time: end of observatio n Times of falling down +/-* 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 * +: positive; -: negative 记录表格示例 2（合计）： Groups N* Dose (mg/kg) Volume of injection (ml/10g body weight) No. of reaction P%** 1 10 2 10 3 10
4 10 5 10 6 10 *Nunber of animals in each group: ◆Positive rate 4.计算： (1)1g①-X-i(EP-0.5) 其中，X=1gD i "lg r EP:阳性率之和 因此，=1g[尾-1(EP-0.5)】 〔2)D的95可信区间 =1g[1gDt1.96S✉] 其中，5为团的标准误： S,=iV(ΣP-∑P2)/a-),n为各组动物数. 以阳性率为银坐标。对数剂量为横坐标，作图 【思考愿】 L.点斜法测定D时，实验设计必须符合哪些条件？ 2测定团，D的意义是什么？ 3.小假腹腔注射简箭毒碱的☐是多少？其95%可信区间是多少？ (畅航章林吉彬李利华)
4 10 5 10 6 10 * Number of animals in each group; ** Positive rate 4．计算： （1）lg ED50=Xm–i（∑P–0.5） 其中， Xm = lg Dmax i =lg r ∑P：阳性率之和 因此， ED50 =lg–1 [Xm–i（∑P–0.5）] （2） ED50的 95%可信区间 = lg–1 [lg ED50±1.96Sx50] 其中，Sx50为 ED50的标准误： ( ) ( 1) 2 Sx50 = i • ∑ P − ∑ P n − ，n 为各组动物数。 以阳性率为纵坐标，对数剂量为横坐标，作图。 【思考题】 1. 点斜法测定 ED50时，实验设计必须符合哪些条件？ 2. 测定 ED50、LD50的意义是什么？ 3．小鼠腹腔注射筒箭毒碱的 ED50是多少？其 95%可信区间是多少？ （杨毓章 林志彬 李利华）