中华人民共和国国家标准 水果、蔬菜汁游离氨基酸含量的测定 GB/T12292-90 Juice of fruits and vegetables- Determination of free amino acid 1主题内容与适用范围 本标准规定了水果、蔬菜汁中游离氨基酸的提取净化及测定方法。 2测定原理 水果、蔬菜汁通过阳离子交换树脂，固定及净化氨基酸。用2molL氢氧化铵把氨基酸 洗脱后，脱氨浓缩。用氨基酸分析仪测定含量。 3仪器设备 3.1氨基酸分析仪或高压液相色谱仪： 3.2玻璃柱，高20cm,内径2cm; 3.3捣碎机： 3.4离心机： 35天平 3.6旋转蒸发器， 3.7真空干燥器。 4试剂 全部试剂均为分析纯，配制试剂均用去离子水， 4.1 阳高子交换树脂.D0wex50v×4型，100~200目，或其他适宜的树脂 4.2 盐酸溶液6mol/L,0.1mol/L. 4.3氢氧化铵溶液2mol/L。 4.4氢氧化钠溶液3.5mol/L。 4.5每种氨基酸标准溶液0.0025M。 46 仪器分析用的各种缓冲液 4.7仪器分析用的茚三酮试剂。 5试样选取和制备 5.1液体产品需充分混匀。 5.2固体产品选取有代表性的水果和蔬菜洗净，擦干，剥去或削去果皮，用四分法取 样150g左右。 5.3称样称取样品100~150g,准确至0.01g,置于捣碎器的玻璃缸内，加入等量的水。 5.4样品捣碎将盛样品的玻璃缸装在捣碎机上，在1档速度捣碎1mi,取出倒入烧杯中。 5.5过滤及离心把已搞碎的样液过波吸取10mL滤液放入离心管中，在4000r/min的转 谏下离心15 56脱果胶 对含果胶丰富的 液需用乙醇处理，准确吸取样液5mL,加入34ml96%乙醇 过滤，用15mL80%乙醇分三次冲洗滤纸，将滤液在35℃下减压蒸馏。 6分析步躁
中华人民共和国国家标准 水果、蔬菜汁 游离氨基酸含量的测定 GB/T 12292-90 Juice of fruits and vegetables— Determination of free amino acid ─────────────────────────────────────── 1 主题内容与适用范围 本标准规定了水果、蔬菜汁中游离氨基酸的提取净化及测定方法。 2 测定原理 水果、蔬菜汁通过阳离子交换树脂,固定及净化氨基酸。用 2mol/L 氢氧化铵把氨基酸 洗脱后,脱氨浓缩。用氨基酸分析仪测定含量。 3 仪器设备 3.1 氨基酸分析仪或高压液相色谱仪； 3.2 玻璃柱,高 20cm,内径 2cm； 3.3 捣碎机； 3.4 离心机； 3.5 天平； 3.6 旋转蒸发器。 3.7 真空干燥器。 4 试剂 全部试剂均为分析纯,配制试剂均用去离子水。 4.1 阳离子交换树脂,Dowex 50W×4 型,100～200 目,或其他适宜的树脂。 4.2 盐酸溶液 6mol/L,0.1mol/L。 4.3 氢氧化铵溶液 2mol/L。 4.4 氢氧化钠溶液 3.5mol/L。 4.5 每种氨基酸标准溶液 0.0025M。 4.6 仪器分析用的各种缓冲液。 4.7 仪器分析用的茚三酮试剂。 5 试样选取和制备 5.1 液体产品 需充分混匀。 5.2 固体产品 选取有代表性的水果和蔬菜洗净,擦干,剥去或削去果皮,用四分法取 样 150g 左右。 5.3 称样 称取样品 100～150g,准确至 0.01g,置于捣碎器的玻璃缸内,加入等量的水。 5.4 样品捣碎 将盛样品的玻璃缸装在捣碎机上,在 1 档速度捣碎 1min,取出倒入烧杯中。 5.5 过滤及离心 把已捣碎的样液过滤,吸取 10mL 滤液放入离心管中,在 4 000r/min 的转 速下离心 15min。 5.6 脱果胶 对含果胶丰富的样液需用乙醇处理,准确吸取样液 5mL,加入 34mL96％乙醇, 过滤,用 15mL80％乙醇分三次冲洗滤纸,将滤液在 35℃下减压蒸馏。 6 分析步骤
6.1固定柱的装置将Dowex50WX4树脂装入玻璃圆柱中，离上端空出钩10cm,用6molL 盐酸250mL活化树脂，然后用水洗至无氯高子为止（用硝酸银检查，不产生白色沉淀）。调 节活塞使溶液流速为1 固定及洗脱 取5m L样液或液体产品，除果胶物的样液则取全部，置玻璃圆柱中 再加5mL水，待液体通过树脂后再加2mol/L氢氧化铵50mL,可分3~4次加完，用50mL水 洗涤， 将加2m0/L氢氧化铵流出的溶液收集在圆底烧瓶内，在减压真空和加热(40~45℃)条件 下蒸发至千用5mL0.1m0/L卦婆解 6.3脱氨 吸取特测液1mL,加入3.5mol/L氢氧化钠溶液2~3滴，调至pH10~11,放在其 空干燥器中减压燕干，用1mL水洗涤，再抽真空燕干，这样重复2次，加入pH2.2缓冲液0.5m 和0.1mol/L盐酸0.5mL,使plH达到22，再稀释5~10倍后测定。 6.4测定用氨基酸分析仪测定氨基骏含量，测定前需做2一3个氨基酸标样，待仪器稳定 后再测试样。 7结果计算 7.1结果表示用mg/kg或mg/L。 7.2计算公式 某个氨基酸含量mgkg)= -×10*(-3)Xd NG 某个氨基酸含量(mg/L)=一×10*(-3)Xd ml 式中：NG 一从仪器测得的某个氨基酸的质量，Ng: 新鲜样品重 mL一 -原始取样体积，mL: d 稀释倍数。 7.3允许差 水果、蔬菜汁游离氨基酸平行测定的结果，相对相差不得大于5%， 附加说明： 本标准由中华人民共和国农业部提出。 科院分析中心 加起草。 本标准主要起草人李伟格、顾金炎、陈必芳。 本标准参照采用NFV76-1151983《水果蔬菜汁中游离氨基酸的测定》。 国家技术监督局1990-03-29批准 1990-12-01实施
6.1 固定柱的装置 将 Dowex 50W×4 树脂装入玻璃圆柱中,离上端空出约 10cm,用 6mol/L 盐酸 250mL 活化树脂,然后用水洗至无氯离子为止（用硝酸银检查,不产生白色沉淀）。调 节活塞,使溶液流速为 1mL/min。 6.2 固定及洗脱 吸取 5mL 样液或液体产品,除果胶物的样液则取全部,置玻璃圆柱中, 再加 5mL 水,待液体通过树脂后再加 2mol/L 氢氧化铵 50mL,可分 3～4 次加完,用 50mL 水 洗涤, 将加 2mol/L 氢氧化铵流出的溶液收集在圆底烧瓶内,在减压真空和加热(40～45℃)条件 下蒸发至干,用 5mL0.1mol/L 盐酸溶解。 6.3 脱氨 吸取待测液 1mL,加入 3.5mol/L 氢氧化钠溶液 2～3 滴,调至 pH10～11,放在真 空干燥器中减压蒸干。用1mL水洗涤,再抽真空蒸干。这样重复2次,加入pH2.2缓冲液0.5mL 和 0.1mol/L 盐酸 0.5mL,使 pH 达到 2.2,再稀释 5～10 倍后测定。 6.4 测定 用氨基酸分析仪测定氨基酸含量,测定前需做 2～3 个氨基酸标样,待仪器稳定 后再测试样。 7 结果计算 7.1 结果表示 用 mg/kg 或 mg/L。 7.2 计算公式 NG 某个氨基酸含量(mg/kg)＝──×10**(-3)×d m NG 某个氨基酸含量(mg/L)＝──×10**(-3)×d mL 式中：NG——从仪器测得的某个氨基酸的质量,Ng； m——新鲜样品重,g； mL——原始取样体积,mL； d——稀释倍数。 7.3 允许差 水果、蔬菜汁游离氨基酸平行测定的结果,相对相差不得大于 5％。 ──────────- 附加说明： 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由中国农业科学院分析测试中心负责起草。 本标准由上海农科院分析中心参加起草。 本标准主要起草人李伟格、顾金炎、陈必芳。 本标准参照采用 NFV 76-115 1983《水果蔬菜汁中游离氨基酸的测定》。 ─────────────────────────────────────── 国家技术监督局 1990-03-29 批准 1990-12-01 实施