病毒感染的检查方法与防治原则 第一节病毒感染的检查方法 1、标本采集与送检： 。用于分离培养的标本： 采取急性期、防止病毒灭活 ●血清学诊断的标本： 双份血清
病毒感染的检查方法与防治原则 第一节 病毒感染的检查方法 1、 标本采集与送检： 用于分离培养的标本： 血清学诊断的标本： 采取急性期、防止病毒灭活 双份血清
2.病毒的形态学检查取含有病毒的组织 细胞，经染色后用光学显微镜观察病毒 包涵体及细胞病变。 ·电镜和免疫电镜 一普通光学显微镜：包涵体
2．病毒的形态学检查 取含有病毒的组织 细胞，经染色后用光学显微镜观察病毒 包涵体及细胞病变。 • 电镜和免疫电镜 – 普通光学显微镜：包涵体
3、常规分离培养与鉴定 三 动物接种 培 鸡胚接种 养 组织培养 器官培养 移植培养 【原代细胞培养 细胞培养了二倍体细胞培养 传代细胞培养
3、常规分离培养与鉴定 动物接种 鸡胚接种 组织培养 器官培养 移植培养 细胞培养 原代细胞培养 二倍体细胞培养 传代细胞培养 三 大 培 养 方 法
病毒在细胞内增殖的指标
病毒在细胞内增殖的指标 正常细胞 病变细胞
。4.检查病毒抗原及抗体： ·常用的抗原抗体检测法有酶联免疫吸附试 验(ELISA) -免疫荧光/固相放射免疫测定/ ·检测特异性抗体的快速诊断：IgM
• 4.检查病毒抗原及抗体: • 常用的抗原抗体检测法有酶联免疫吸附试 验（ELISA） – 免疫荧光 / 固相放射免疫测定 / • 检测特异性抗体的快速诊断：IgM
ELISA for HIV antibody sample Dilue can TM 2%0 ml pping Microplate ELISA for HIV antibody:coloured wells indicate reactivity
ELISA for HIV antibody Microplate ELISA for HIV antibody: coloured wells indicate reactivity
·5.病毒核酸的检测： (1)病毒核酸杂交技术 是一种特异、快速、能定量分型、应用面广 的诊断新技术 利用核苷酸可在体外一定条件下解离、重组 的特性，将一条已知的单链DNA或RNA用同 位素或非放射性核素标记后作为探针，根据 碱基配对原则，与待测标本中相应的单链 DNA或RNA配对，形成核酸杂交体，然后通 过标记物来检测待定的核酸
• 5.病毒核酸的检测： • (1)病毒核酸杂交技术 • 是一种特异、快速、能定量分型、应用面广 的诊断新技术 • 利用核苷酸可在体外一定条件下解离、重组 的特性，将一条已知的单链DNA或RNA用同 位素或非放射性核素标记后作为探针，根据 碱基配对原则，与待测标本中相应的单链 DNA或RNA配对，形成核酸杂交体，然后通 过标记物来检测待定的核酸
(2)聚合酶链反应(PCR): 它是一种快速体外扩增特异性DNA片段的 新技术。（使待测的DNA扩增109倍，使标本中 极其微量的核酸被检出。) 该法是先将待检标本中核酸提取，加热变 性为单链作为模板，然后加入与模板基因有互补 关系的引物、合成寡核苷酸所需的原料及DNA 多聚酶等，在一定温度条件下使其按模板序列 合成新的互补链。经过25~30个循环后，就可 使DNA片段扩增109倍，大大提高了检测率 此法敏感性极高，但需注意因操作时污染而出 现的假阳性
(2)聚合酶链反应（PCR）： 它是一种快速体外扩增特异性DNA片段的 新技术。(使待测的DNA扩增109倍，使标本中 极其微量的核酸被检出。) 该法是先将待检标本中核酸提取，加热变 性为单链作为模板,然后加入与模板基因有互补 关系的引物、合成寡核苷酸所需的原料及DNA 多聚酶等，在一定温度条件下使其按模板序列 合成新的互补链。经过25～30个循环后，就可 使DNA片段扩增109倍，大大提高了检测率 此法敏感性极高，但需注意因操作时污染而出 现的假阳性
3.基因芯片技术(microarray chip） Prepare cDNA Probe Prepare Microarray "Normal" Tumor 父入 RT/PCR 秘 Combine Amounts ●●● 8d6 microarray SCAN Microarray Technology
3.基因芯片技术（microarray chip）
光镜 --包涵体 电镜 病毒的快速诊断 免疫荧光 ELISA 杂交 分子生物学技术 PCR
病毒的快速诊断 光镜-----包涵体 电镜 免疫荧光 ELISA 分子生物学技术 杂交 PCR