尼氏染色 生理心理教研室
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尼氏染色法 ■尼氏染色法是德国病理学家F.Nissl(1860一19 19)于1892年创立的。 ■碱性染料染色，发现神经元胞体中的尼氏体
一 尼氏染色法 ◼ 尼氏染色法是德国病理学家F. Nissl（１８６０－１９ １９）于１８９２年创立的。 ◼ 碱性染料染色，发现神经元胞体中的尼氏体
神经细胞的尼氏体 ■尼氏体(Nissl body)：是胞质内的一种嗜碱性物质， 泛见于各种神经元，但其形状大小和数量则各有 差算。 ■ 在电镜下观察，尼氏体主要由平行排列的粗面内质 网和多聚核糖体组成。，尼氏体的主要功能是合成蛋 岛大 白质， 突骗的蛋宜质天都来直胞体的尼民体。神经元在兴 奋传旱过程中，不断消 某些蛋白质物质，尼民体 司合成新的蛋白质以补充这种消耗
二 神经细胞的尼氏体 ◼ 尼氏体（Nissl body）：是胞质内的一种嗜碱性物质， 广泛见于各种神经元，但其形状大小和数量则各有 差异。 ◼ 在电镜下观察，尼氏体主要由平行排列的粗面内质 网和多聚核糖体组成。尼氏体的主要功能是合成蛋 白质，作为神经活动时所需，如细胞中的某些成分 的更新以及产生神经递质有关的蛋白质和酶类。轴 突端的蛋白质大都来自胞体的尼氏体。神经元在兴 奋传导过程中，不断消耗某些蛋白质物质，尼氏体 可合成新的蛋白质以补充这种消耗
尼氏染色的优势 ■以往显示神经元尼氏体多采用苏木精-伊红染色方法， 此法虽然也能观察到胞质中嗜碱性颗粒，但结构不甚 清晰，胞核、核仁、尼氏体颗粒模糊，分界不清，轴突、 树突难以辨认。 在尼氏染色中尼氏体清晰可辨，胞核、核仁也非常清 晰，而且很容易区分轴突和树突，收到了既可辨认器官 又可同时观察细胞质特殊结构的效果。尼氏染色中尼 氏体受染后呈块状（形如虎斑）或颗粒状，核周围尼氏 体颗粒较大，近边缘处较小而细长，如在生理情况下，尼 氏体大而数量多，反映神经细胞合成蛋白质的功能较 强，在神经元受损时，尼氏体的数量可减少甚至消失
三 尼氏染色的优势 ◼ 以往显示神经元尼氏体多采用苏木精-伊红染色方法, 此法虽然也能观察到胞质中嗜碱性颗粒,但结构不甚 清晰,胞核、核仁、尼氏体颗粒模糊,分界不清,轴突、 树突难以辨认。 ◼ 在尼氏染色中尼氏体清晰可辨,胞核、核仁也非常清 晰,而且很容易区分轴突和树突,收到了既可辨认器官 又可同时观察细胞质特殊结构的效果。尼氏染色中尼 氏体受染后呈块状(形如虎斑) 或颗粒状,核周围尼氏 体颗粒较大,近边缘处较小而细长,如在生理情况下,尼 氏体大而数量多,反映神经细胞合成蛋白质的功能较 强,在神经元受损时,尼氏体的数量可减少甚至消失
四 尼氏染色的应用 ■观察神经元内的细胞结构： ■通过尼氏染色后对尼氏体的观察来了解神经元的 损伤： ■检验实验动物脑区损毁或埋藏电极的位置
四 尼氏染色的应用 ◼ 观察神经元内的细胞结构； ◼ 通过尼氏染色后对尼氏体的观察来了解神经元的 损伤； ◼ 检验实验动物脑区损毁或埋藏电极的位置
五尼氏染色步骤 1 切片脱脂，程序如下： 二甲苯I(5min)--二甲苯II(5min)--100%酒精 (2min)-100%酒精II(2min)-95%酒精 (2min)--80%酒精(2min)-70%酒精(2min)
五 尼氏染色步骤 1 切片脱脂，程序如下： 二甲苯I（5min）---二甲苯II （5min）---100%酒精I （2min）---100%酒精II （2min）---95%酒精 （2min）---80%酒精（2min）---70%酒精（2min）
切片浸入蒸馏水过洗，约lmin: 3 切片染色：将切片浸入工作染液中，室温下10~20min; 4 切片入蒸馏水水洗 切片再依次浸入70%、80%、95%的酒精中，每次约 1~2min: 6 切片如特殊分色液中分色 7 切片浸入100%酒精缸，II,各2min 切片浸入二甲苯I,II,透明各2min 树脂胶封片
2 切片浸入蒸馏水过洗，约1min； 3 切片染色：将切片浸入工作染液中，室温下10~20min； 4 切片入蒸馏水水洗 5 切片再依次浸入70%、80%、95%的酒精中，每次约 1~2min； 6 切片如特殊分色液中分色 7 切片浸入100%酒精I，II，各2min 8 切片浸入二甲苯I，II，透明各2min 9 树脂胶封片