重庆医药高等专科学校教案（首页） 课程《药品生物检定技术》 单元（章） 综合实训项目八 课恩：综合实训项目八葡登糖挂射液的无南检查 学时 8 戴学资源：《药品生物检定技术)李榆梅主编。化学工业出版社，国家线划数材 教学类亚，实验技能训练 散学方法： 直观教学法，情境教学法，案例教学法、角色转换教学法、启发引导教学法 专业班次 授课日期 知识与能力要求： 1、能使用《中国药典》《中国药品检单操作线范)，根据药品种类确定药品的微生物检验 项目。 2、能根据采样规定，正确采集与处理样品， 3、会用直接接种法对小含灭南成份的水溶性制剂进行无菌检查。 重难点！ 重点：葡萄糖注射液的无面检查（直接接种法） 难点：方法验证 课后记： 任课老师： 年月日 教研室主任： 年月日
重庆医药高等专科学校教案（首页） 课程 《药品生物检定技术》 单元（章） 综合实训项目八 课题：综合实训项目八 葡萄糖注射液的无菌检查 学时 8 教学资源：《药品生物检定技术》李榆梅主编，化学工业出版社，国家规划教材 教学类型： 实验技能训练 教学方法： 直观教学法、情境教学法、案例教学法、角色转换教学法、启发引导教学法 专业班次 授课日期 知识与能力要求： 1、能使用《中国药典》《中国药品检验操作规范》，根据药品种类确定药品的微生物检验 项目。 2、能根据采样规定，正确采集与处理样品。 3、会用直接接种法对小含灭菌成份的水溶性制剂进行无菌检查。 重难点： 重点：葡萄糖注射液的无菌检查（直接接种法） 难点：方法验证 课后记： 任课老师 ： 年 月 日 教研室主任: 年 月 日
散学内容及方法 备注 综合实训项目八葡萄糖注射液的无菌检查 教学设计： 课前准备 一，布置实训任务（上次课结束前布置） 二、小组分工： 各班分成2个大组。每大组8个小组。每小组34人。 三、学生自主学习并完成实训方案的设计： 1、《查询中国药典》《中国药品检验操作规范》，确定检验项目及检 验方法 2、小组讨论，列出需要准备的实验用物 3、确定检验程序 4、设计实训方案（包括检验步骤、材料准备、时间安排，工作流 程，组内任务分工等，要求内容详实)。 四、老师检查实训方案 老师利用课外时间检查学生实训方案，不符合要求的责令重新修 定，直到合格为止。 上课安排 第一次课(40分钟) 一、老师评价学生设计的实训方案，并提出参考方案(20分钟) 二、观看规范的操作录像。解释操作细节及注意事项。(20分钟) 第二次课(3节，120分钟) 一、配制所需的培养基，按要求灭菌：准备实验材料（需灭菌的要 同时灭菌)。 (80分钟) 1、培养基： 硫乙醇酸盐流体培养基：改良马丁培养基 2、其他：
教 学 内 容 及 方 法 备 注 综合实训项目八 葡萄糖注射液的无菌检查 教学设计： 课前准备： 一、布置实训任务（上次课结束前布置） 二、小组分工： 各班分成 2 个大组，每大组 8 个小组，每小组 3-4 人。 三、学生自主学习并完成实训方案的设计： 1、《查询中国药典》《中国药品检验操作规范》，确定检验项目及检 验方法 2、小组讨论，列出需要准备的实验用物 3、确定检验程序 4、设计实训方案（包括检验步骤、材料准备、时间安排，工作流 程，组内任务分工等，要求内容详实）。 四、老师检查实训方案 老师利用课外时间检查学生实训方案，不符合要求的责令重新修 定，直到合格为止。 上课安排 第一次课（40 分钟） 一、老师评价学生设计的实训方案，并提出参考方案（20 分钟） 二、观看规范的操作录像，解释操作细节及注意事项。（20 分钟） 第二次课（3 节，120 分钟） 一、配制所需的培养基，按要求灭菌；准备实验材料（需灭菌的要 同时灭菌）。 （80 分钟） 1、培养基： 硫乙醇酸盐流体培养基；改良马丁培养基 2、其他：
散华内容及方法 备注 盛有75%乙醇消毒液的玻璃缸、乙醇灯、火柴、75%乙醇棉、碘伏 棉等：领子、试管，量简、三角瓶、刻度吸管(1、5、0m)、注射器 2、5、1Om)(需灭南)：无南衣、牌，帽，口甲（需灭岗）.活化 南种(40分钟) 1、菌种：金黄色葡萄躁菌：(2)枯草才孢朴茵：()大肠埃希南： 〔4)钥绿假单电菌：（⑤）生孢梭茵：(6)白色念珠菌：(7黑曲霉 第三次课(4节，共160分钟) 三、直接接种法方法验证试验： 8支硫乙醇酸盐培养基，分别接种金黄色简药球齿、绿燕杆苗、 生孢校菌各2支，4支议良与丁培养$，分别按种白色念珠齿、黑曲 毒南各2支。其中1支接入规定量的供试品，另一支作阳性对照， 将含培养基的容器按规定温度培养3一5天。各试验菌及相应的 培养基逐一进行验证。与闭性对照比较，如含供试品各容器申的试验 菌均生长良好，并日与阳性对照容器内的哈养结果相似，则供试品的 该检验量在该检验条件下无抑苗作用或抑茵作用消除，供试品可按该 法进行无南检查。 四、样品采集与处理： 供试品在移入缓冲问前应除去外包装、消毒外表面并编号，挤养基 管（瓶）用0.1%新洁尔灭或酒精棉擦拭瓶（管）外壁，然后连同其 他用具（包括无菌衣、帽、口罩等）移人缓冲间，开启操作间紫外灯 和空气过滤装置并使其工作1小时以上 操作人员用肥皂、水清洗双手，关闭紫外光灯，进人缓冲间，换 施牡，再用75%乙碑棉球擦手，穿戴农、相、罩、手套。将所需物品 刘去牛皮纸，移入无菌问，每次试验中所用物品必须计划好，并有备 用物。 将消毒过的安瓿针剂先用隙酒棉球或隙伏棉球将安瓿外部擦拭灭 苗，待干，用砂轮或灭茵继轻割安部须部（便于折开安甑），再用7% 乙醇棉球将隙酒擦净。待干。用灭喇镊取出注射器。在火常旁将针芯
教 学 内 容 及 方 法 备 注 盛有 75%乙醇消毒液的玻璃缸、乙醇灯、火柴、75%乙醇棉、碘伏 棉等；镊子、试管、量筒、三角瓶、刻度吸管(1、5、l0ml)、注射器 (2、5、lOml) （需灭菌）；无菌衣、裤、帽、口罩（需灭菌）、活化 菌种（40 分钟） 1、菌种：金黄色葡萄球菌；(2)枯草芽孢杆菌；(3)大肠埃希菌； (4)铜绿假单胞菌；(5)生孢梭菌；(6)白色念珠菌；(7)黑曲霉 第三次课（4 节，共 160 分钟） 三、直接接种法方法验证试验： 8 支硫乙醇酸盐培养基，分别接种金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、 生孢梭菌各 2 支，4 支改良马丁培养基，分别接种白色念珠菌、黑曲 霉菌各 2 支。其中 1 支接入规定量的供试品，另一支作阳性对照。 将含培养基的容器按规定温度培养 3～5 天。各试验菌及相应的 培养基逐一进行验证。与阳性对照比较，如含供试品各容器申的试验 菌均生长良好，并且与阳性对照容器内的培养结果相似，则供试品的 该检验量在该检验条件下无抑菌作用或抑菌作用消除，供试品可按该 法进行无菌检查。 四、样品采集与处理： 供试品在移入缓冲间前应除去外包装、消毒外表面并编号，培养基 管（瓶）用 0.1%新洁尔灭或酒精棉擦拭瓶（管）外壁，然后连同其 他用具（包括无菌衣、帽、口罩等）移人缓冲间，开启操作间紫外灯 和空气过滤装置并使其工作 1 小时以上。 操作人员用肥皂、水清洗双手，关闭紫外光灯，进人缓冲间，换 拖鞋，再用 75%乙醇棉球擦手，穿戴衣、帽、罩、手套。将所需物品 剥去牛皮纸，移入无菌间，每次试验中所用物品必须计划好，并有备 用物。 将消毒过的安瓿针剂先用碘酒棉球或碘伏棉球将安瓿外部擦拭灭 菌，待干，用砂轮或灭菌锉轻割安瓿颈部（便于折开安瓿），再用 75% 乙醇棉球将碘酒擦净，待干。用灭菌镊取出注射器，在火焰旁将针芯
数学内容及方获 备注 福入针管并安上针头，供试品瓶盖利和注射器针头均应远速通过火焰数 次：打开待检样品的铝盖，吸收适量药液加入0.%无蓝氯化钠诺液 至具塞的瓶中，混匀 五，无南检查（直接接种法） 无南操作方法将制备妥的供试品接种于货乙醇酸盐培养基共] 管。（其中·管换作结束后移至接种室接种金黄色葡萄球菌作对照菌 液1ml,轻轻摇匀，32.5士2.5℃培养14大.无菌操作方法将供试品 接种于改良马丁氏培养基10管，轻轻摇匀，25.5土2.5℃培养14天. 第四次课(2节，80分钟) 六、纺果烈察 学生利用课外时问，每天观察一次结果，并记录 第十四大，全址在老师指导下一起观察结果并记录结果 结来判定： 1、供试品符合规定： 供试品管均澄清，或虽显浑浊但确证无菌生长 2、供试品不符合规定： 若供试品警中任何一管显阵浊并确证有苗生长 3、试验结果无效： 1)、设备及环境的微生物监控结果不符合无岗检香法的要求 2)、无南试验过程中有可能引起微牛物污染的因素 3)、阴性对照管有生长 4)、供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所 使用的物品或操作技术不当引起的. 六、考核： (10分钟) 1、根据学生的实验纺果、操作规范性、方案设计的合理性进行 综合评价， 2、点评考核情况 五、实训小结，并布置下次课的实训内容。(5分钟)
教 学 内 容 及 方 法 备 注 插入针管并安上针头，供试品瓶盖和注射器针头均应迅速通过火焰数 次；打开待检样品的铝盖，吸取适量药液加入 0. 9%无菌氯化钠溶液 至具塞的瓶中，混匀。 五、无菌检查（直接接种法） 无菌操作方法将制备妥的供试品接种于硫乙醇酸盐培养基共 11 管。(其中一管操作结束后移至接种室接种金黄色葡萄球菌作对照菌 液 1ml)，轻轻摇匀，32.5±2.5℃培养 14 天。无菌操作方法将供试品 接种于改良马丁氏培养基 10 管，轻轻摇匀， 25.5±2.5℃培养 14 天。 第四次课（2 节，80 分钟） 六、结果观察 学生利用课外时间，每天观察一次结果，并记录。 第十四天，全班在老师指导下一起观察结果并记录结果 结果判定： 1、供试品符合规定： 供试品管均澄清，或虽显浑浊但确证无菌生长 2、供试品不符合规定： 若供试品管中任何一管显浑浊并确证有菌生长 3、试验结果无效： 1)、设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求 2)、无菌试验过程中有可能引起微生物污染的因素 3)、阴性对照管有菌生长 4)、供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所 使用的物品或操作技术不当引起的。 六、考核： （10 分钟） 1、根据学生的实验结果、操作规范性、方案设计的合理性进行 综合评价。 2、点评考核情况。 五、实训小结，并布置下次课的实训内容。（5 分钟）