重庆医药高等专科学校教案（首页） 课程 《药品生物检定技术》 单元（章） 综合实训项目十 三 课趣：综合实训项目十三抗生素效价的微生物检定法 链莓素的效价测定 学时 6 教学资源：《药品生物检定技术》李榆梅主编。化学工业出版社，国家规划教材 教学类型：实验技能训纸 教学方法： 直观教学法、情境教学法、案例教学法、角色转换教学法、启发引导教学法 专业班次 授澡日期 知识与能力要求： 1。掌握管躁法的基本原理和方法， 2.掌握二剂量法测定链霉素效价的操作。 重难点： 重点：管球法的基本原理和方法。 难点：二剂量法测定链霉素效价的操作。 课后记： 任课老师： 年月日 教研室主任 年月日
重庆医药高等专科学校教案（首页） 课程 《药品生物检定技术》 单元（章） 综合实训项目十 三 课题：综合实训项目十三 抗生素效价的微生物检定法—— 链霉素的效价测定 学时 6 教学资源：《药品生物检定技术》李榆梅主编，化学工业出版社，国家规划教材 教学类型： 实验技能训练 教学方法： 直观教学法、情境教学法、案例教学法、角色转换教学法、启发引导教学法 专业班次 授课日期 知识与能力要求： 1．掌握管碟法的基本原理和方法。 2．掌握二剂量法测定链霉素效价的操作。 重难点： 重点：管碟法的基本原理和方法。 难点：二剂量法测定链霉素效价的操作。 课后记： 任课老师 ： 年 月 日 教研室主任: 年 月 日
敦学内容及方法 备注 综合实训项目十三 抗生素效价的微生物检定法—能霉 素的效价测定 教学设计： 第1次课 一、准备知识教学 (一) 1。抗生素微生物检定法可分为稀释法、浊度法、管法。 2.稀释法主要用于测定抗生素的最低抑菌浓度。 3.浊度法和管臻法主要用于抗生素效价的测定。 (二) 1检定原理 管臻法又称杯碳法。是通过将不锈钢小管（俗称为牛津杯）放置 在含敏感试验菌的琼雨培养基上，将抗生素溶液注入小钢管中，抗生 素分子随溶剂向培养基内呈球面状放射状扩散。同时将培养基置入适 宜试验菌生长的培养箱内，使试验菌开始生长。抗生素分子在琼脂培 养基中的浓度随与小钢管间距离的增大而降低，离小钢管越远，培养 基中的抗生素分子越少，相应的抗生素浓度越低。当抗生素分子扩散 达到一定时间。可在小钢管周围形成一个抑菌圈。抗生素溶液的浓度 不同。抑菌图的大小也不。 2.检定的影响因素 3. 管臻法分类 4.二剂量法效价计算方法 二、安排检验方案设计 (一)操作流程 管绿法操作蓬程主要包括： 1.试验用菌液、缓冲液、培养基的配制按药典规定进行制备 2,标准品与供试品溶液的制备按药典规定制备标准品与供试
教 学 内 容 及 方 法 备 注 综合实训项目十三 抗生素效价的微生物检定法——链霉 素的效价测定 教学设计： 第 1 次课 一、准备知识教学 （一） 1．抗生素微生物检定法可分为稀释法、浊度法、管碟法。 2．稀释法主要用于测定抗生素的最低抑菌浓度。 3．浊度法和管碟法主要用于抗生素效价的测定。 （二） 1.检定原理 管碟法又称杯碟法，是通过将不锈钢小管（俗称为牛津杯）放置 在含敏感试验菌的琼脂培养基上，将抗生素溶液注入小钢管中，抗生 素分子随溶剂向培养基内呈球面状放射状扩散。同时将培养基置入适 宜试验菌生长的培养箱内，使试验菌开始生长。抗生素分子在琼脂培 养基中的浓度随与小钢管间距离的增大而降低，离小钢管越远，培养 基中的抗生素分子越少，相应的抗生素浓度越低。当抗生素分子扩散 达到一定时间，可在小钢管周围形成一个抑菌圈。抗生素溶液的浓度 不同，抑菌圈的大小也不。。 2. 检定的影响因素 3. 管碟法分类 4. 二剂量法效价计算方法 二、安排检验方案设计 （一）操作流程 管碟法操作流程主要包括： 1．试验用菌液、缓冲液、培养基的配制 按药典规定进行制备。 2．标准品与供试品溶液的制备 按药典规定制备标准品与供试
敏学内容及方法 备往 品高、低不同浓度的溶液。 3.双碟的制备制备底层及含一定量试验菌的菌层，并安置小 钢管。 4,滴加药液到小钢管内将标准品、供试品溶液滴入相应的小 钢管中。注意滴加顺序及高、低剂量溶液的滴加顺序：控制加样操作， 以保证滴加样品溶液速度及量的均匀一致。 5,培养在恒温培养箱中培养至规定时间，在培养箱中水平叠 放的双球数以不超过3个为宜。 6.抑菌圈测量可用于手工测量或仪器测量，每组试验双绿应 在相同的测量参数下进行测量 7,计算结果先进行可靠性测验，若符合规定，再进行效价计 算。 三、学生分组做实验前准备。（课外时间） 任务：链霉素的效价测定 要求：学生分组，利用课外时间查找相关资料，主要是2010年板《中 国药典》及《中国药品检验标准操作规范》，确定检验程序，设计详 细的检验方案。老师审核修改每组学生的检验方案。 三、学生分组做实验前准备。（课外时间） 第2次课 一、学生观看标准操作录像。 二、老师发放链霉素，学生在老师指导下完成样品处理、供试液制备 和培养基的制备的操作。 三、学生分组完成操作，进行点样， 四、学生在老师指导下完成培养工作。 五、随机抽一名学生演示上述操作，由同学们充当评委，指出操作不 当之处。 六、根据中国药典，对检验结果进行判断。 七、老师组织组间评比，评比内容包括方案设计的合理性、操作的规
教 学 内 容 及 方 法 备 注 品高、低不同浓度的溶液。 3．双碟的制备 制备底层及含一定量试验菌的菌层，并安置小 钢管。 4．滴加药液到小钢管内 将标准品、供试品溶液滴入相应的小 钢管中。注意滴加顺序及高、低剂量溶液的滴加顺序；控制加样操作， 以保证滴加样品溶液速度及量的均匀一致。 5．培养 在恒温培养箱中培养至规定时间，在培养箱中水平叠 放的双碟数以不超过 3 个为宜。 6．抑菌圈测量 可用于手工测量或仪器测量，每组试验双碟应 在相同的测量参数下进行测量。 7．计算结果 先进行可靠性测验，若符合规定，再进行效价计 算。 三、学生分组做实验前准备。（课外时间） 任务：链霉素的效价测定 要求：学生分组，利用课外时间查找相关资料，主要是 2010 年版《中 国药典》及《中国药品检验标准操作规范》，确定检验程序，设计详 细的检验方案。老师审核修改每组学生的检验方案。 三、学生分组做实验前准备。（课外时间） 第 2 次课 一、学生观看标准操作录像。 二、老师发放链霉素，学生在老师指导下完成样品处理、供试液制备 和培养基的制备的操作。 三、学生分组完成操作，进行点样。 四、学生在老师指导下完成培养工作。 五、随机抽一名学生演示上述操作，由同学们充当评委，指出操作不 当之处。 六、根据中国药典，对检验结果进行判断。 七、老师组织组间评比，评比内容包括方案设计的合理性、操作的规
散学内容及方法 备注 范性、报告方法及检验结果的准确性等，由同学代表和老师共同综合 上述各项打分 四、知识梳理： 1、抗生素微生物检定法的种类。 2、管球法测定效价的原理。 3、管臻法的检定方法， 4、二剂量法的报告处理方法， 课后任务： 1、完成检验报告。 2、娜些因素会影响二剂量法测定结果的准确性？哪些情况出现时结 果可判定为无效？
教 学 内 容 及 方 法 备 注 范性、报告方法及检验结果的准确性等，由同学代表和老师共同综合 上述各项打分。 四、知识梳理： 1、抗生素微生物检定法的种类。 2、管碟法测定效价的原理。 3、管碟法的检定方法。 4、二剂量法的报告处理方法。 课后任务： 1、完成检验报告。 2、哪些因素会影响二剂量法测定结果的准确性？哪些情况出现时结 果可判定为无效？